ÖZET

HBeAg/anti-HBe serokonversiyonu hepatit B enfeksiyonlarının tanısında sık kullanılan göstergelerden birisidir. Bu çalışmada serolojik testlerde kullanılan HBeAg proteinini elde etmek amacıyla hepatit B virüsü (HBV) “e” antijen gen bölgesi Saccharomyces cerevisiae’ya aktarıldı ve eksprese ettirildi. Bunun için öncelikle HBeAg gen bölgesi PCR yöntemiyle çoğaltıldı. Daha sonra amplikonlar TOPO® TA ekspresyon kiti ile pYES2.1 plazmidine klonlandı ve kompetan bakteriye (TOPO 10F’ Escherichia coli) transforme edildi. Ampisilinli LB agarda çoğaltılan kompetan bakteriden pYES2.1+HBeAg plazmidi izole edildi ve S.c. EasyComp transformasyon kitiyle Saccharomyces cerevisiae’ya transforme edildi. Son olarak, HBeAg’nin maya tarafından eksprese edilip edilmediği iki farklı otomatize sistem aracılığıyla kontrol edildi. Elde edilen HBeAg üreten maya hücreleri sonraki çalışmalarda üretilen proteinlerin pür olarak elde edilmesine imkan sağlayabilir.